菌落总数检测

1、为什么平板计数琼脂需要调节pH？

由于大部分细菌是嗜中性的，培养基为符合细菌生长要求，需要调节pH至7.0±0.2，尽量保证较适宜的环境，确保检测结果的准确性。

2、如何保证检测结果的有效性？
设计空白对照

（1）检验过程中需要做空白对照，用来判断培养基、稀释液、平皿或吸管是否存在污染，完美的空白试验平板上应该无细菌生长。

实验环境要求

（2）定期检测空气洁净度，判断实验环境是否符合标准要求。

灭菌处理

（3）细菌检测过程中所用到的一切用具和培养基都需经过灭菌程序。

3、如何提高检测结果的准确性？

样品消毒

（1）任何样品在打开包装前，都要在取样开口处的周围表面进行消毒。

（2）采样时对于易堵塞吸管的样品（如糕点面包辣条等），可以放置一块无菌纱布在放样液的容器瓶口下方，作过滤用。

稀释度选择

 

（3）不同的食品其「菌落总数」的检出限量也不一致，通常糕点类样品中细菌量偏低，稀释度应选择较小的，稀释度可选1:10。

 

糕点的菌落总数限量标准

 

4、为什么琼脂凝固后需要倒置？

平板倒置培养，可以减少培养基中水分的蒸发影响细菌生长，又可以防止凝结在皿盖上的水蒸气流到培养基表面导致染菌出现菌落蔓延及难以计数。

 

5、为什么培养基干裂？

干裂是培养基的水份缺失导致，通常2种原因：

（1）培养箱内部温度不稳定导致；

（2）培养基倒得太薄。

 

6、菌落蔓延的原因及解决办法？

菌落蔓延主要有两个原因，一是操作不当；二是样品中含有变形杆菌等运动性强的细菌。

 

 

 

 

操作中需要注意3个关键点：

（1）倾注培养基时摇晃平皿使其混合均匀，减少菌块；

（2）样品稀释后，尽快倾注平板。从稀释到倾注结束时间控制在30分钟之内，避免样液干涸造成菌落成团；平板凝固后马上倒置；

（3）若样品中含有变形杆菌，则可以覆盖一层培养基（约4mL）。

 

7、异常现象平板如何进行菌落计数？

适宜范围

多不可计

 

在完成培养后应立即进行计数，通常选取30-300CFU菌落数、无蔓延菌落生长的平板作为计数，但实际操作中会出现各种异常现象。

我们通过以下表格查看：

现象	计数方式
无任何明显界限的链状菌落	作为一个菌落
有几条不同来源的链	每条链均应按一个菌落计算
片状菌落不到平板一半，而另一半又分布均匀	半个平板的菌落数乘2代表整块平板的菌落数

 

另外，当所有稀释度的平板均无细菌生长，则检测报告应以最低稀释度报出，如最低稀释度为1，则报为＜1；若最低稀释度为1:10，则报为＜10，而不能报为「未检出」。